羊ELISA試劑盒作用的基本原理：抗原或抗體能吸附到固相載體表面，并保持其免疫學(xué)活性；抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，仍保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。
羊ELISA試劑盒使用的一些技巧：
1.血清：室溫血液天然凝結(jié)10-20分鐘，離心20分鐘左右。細(xì)心搜集上清，保存過程中如呈現(xiàn)沉積，應(yīng)再次離心。
2.血漿：應(yīng)根據(jù)羊ELISA試劑盒的標(biāo)本的要求挑選EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右，保存過程中如有沉積構(gòu)成，應(yīng)該再次離心。
3.尿液：用無菌管搜集，離心20分鐘左右。細(xì)心搜集上清，保存過程中如有沉積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管搜集。離心20分鐘左右。細(xì)心搜集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度到達(dá)100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有沉積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
5.安排標(biāo)本：切開標(biāo)本后，稱取分量。參加一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本消融后依然堅(jiān)持2-8℃的溫度。參加一定量的PBS，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充沛。離心20分鐘左右。細(xì)心搜集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其他冷凍備用。
6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行試驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)防止反復(fù)凍融.
