1.基本原理:
采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。在預(yù)包被抗昆蟲蛻皮激素抗體的微孔酶標(biāo)板中,加入昆蟲蛻皮激素校準(zhǔn)品和待測樣本,再加入HRP標(biāo)記的昆蟲蛻皮激素抗原。經(jīng)過溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固相表面形成固相抗體-酶標(biāo)抗原的免疫復(fù)合物。加底物A和B,底物在HRP催化下產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,在終止液作用下最終轉(zhuǎn)化為黃色。在酶標(biāo)儀450nm波長上測定吸光度(OD值),吸光度與待測樣品中昆蟲蛻皮激素的濃度負(fù)相關(guān),通過擬合校準(zhǔn)品曲線可計算出樣本中昆蟲蛻皮激素的濃度。
2.主要組成成分
酶標(biāo)板:如96T或48T規(guī)格的預(yù)包被抗昆蟲蛻皮激素抗體的微孔板。
標(biāo)準(zhǔn)品:不同濃度的昆蟲蛻皮激素校準(zhǔn)品,用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
酶標(biāo)試劑:HRP標(biāo)記的昆蟲蛻皮激素抗原。
樣本稀釋液:用于稀釋待測樣本。
底物液:包括底物A和底物B,用于顯色反應(yīng)。
洗滌液:通常是濃縮洗滌液,使用時需按要求稀釋。
終止液:一般為2M硫酸,用于終止顯色反應(yīng)。
其他配件:如封板膜、說明書等。
3.昆蟲蛻皮激素(Ecdysone)ELISA試劑盒適用范圍:
適用于測定昆蟲血清、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本中的昆蟲蛻皮激素含量。
技術(shù)特點
特異性:可檢測樣本中的昆蟲蛻皮激素,且與其它類似物無明顯交叉反應(yīng)。
靈敏度:一般可達0.1μg/mL左右,能準(zhǔn)確檢測低濃度的昆蟲蛻皮激素。
重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%,保證了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
精密度:用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示,批內(nèi)CV<10%,批間差CV<13%。
穩(wěn)定性:在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,活性降低率小于5%。
