elisa試劑盒是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。
elisa試劑盒規(guī)范使用,效果會更好
1、樣本的收集及血清分離中要留意盡量防止細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的成長,其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應(yīng)酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性攪擾。
2、血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則能夠在2~8℃下保存一周,豬elisa試劑盒如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長期保存,應(yīng)在-70℃以下。
3、要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有相似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的豬elisa試劑盒測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育進(jìn)程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
4、標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所造成的的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉積后取上清檢測。Elisa試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的試驗(yàn)確診辦法。因?yàn)槠湓噭┌卜€(wěn)、易保存,操作簡便,成果判斷較客觀等要素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)查驗(yàn)的各領(lǐng)域中。
5、冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。豬elisa試劑盒標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞作用,然后引起假陰性成果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意,不要進(jìn)行劇烈振動,重復(fù)倒置混勻即可。
在進(jìn)行elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí),各項(xiàng)條件的選擇也是非常重要的:
1、固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚苯乙烯、纖維素等。其形式可以是凹孔平板、珠粒等。目前常用的是四十孔的聚苯乙烯凹孔板。不論使用哪一種載體,在使用前進(jìn)行篩選:在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)的均一性如何,以此來判斷其吸附性能是否良好。
2、包被抗體的選擇:將抗體吸附在固相載體表面的時(shí)候,一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度,進(jìn)行包被后,當(dāng)其它試驗(yàn)條件大致一樣的情況下,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇蛋白量少,OD值大的濃度。